弹性蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶,同时也能水解酰胺和酯类。由于弹性蛋白在结缔组织的弹性纤维中浓度最高,弹性蛋白酶常用于解离含有大量细胞间纤维网络的组织。结缔组织细胞和纤维所嵌入的黏稠细胞外基质是一种由多种糖蛋白组成的复杂混合物。鉴于该基质的复杂性,当弹性蛋白酶与其他酶(如胶原酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶)联合使用时,蛋白水解消化效果最佳。
本产品来源于猪胰腺,猪胰腺弹性蛋白酶由一条包含240个残基的单肽链组成,含有四个二硫键,分子量约25.9 KDa,pH最佳值约为8.5。它与其他物种的胰腺弹性蛋白酶具有高度的序列同源性,比如与大鼠有86%的同源性。弹性酶I和弹性酶II基因在序列上具有相似性,尤其是在5'近端侧翼区域,包括TATA盒和一个假定的组织特异性增强子序列。猪弹性蛋白酶I特异于Ala-Ala和Ala-Gly键,而弹性蛋白酶II则对P1位中至大疏水氨基酸的底物具有广泛特异性。猪弹性蛋白酶是最强效的弹性蛋白酶,其速率比人类白细胞弹性蛋白酶高出20倍。
猪胰腺弹性蛋白酶在蛋白酶中具有独特性——能够水解天然弹性蛋白,而这种底物不会被胰蛋白酶、糜蛋白酶或胃蛋白酶攻击。大豆胰蛋白酶抑制剂和激肽释放酶抑制剂能够抑制蛋白水解活性,但不抑制弹性蛋白酶水解活性。
本产品以冻干粉形式提供,广泛应用于组织和细胞解离操作,在II型肺细胞分离中效果尤其显著。
酶类产品选购指南:
| 产品形式 | 产品货号 | 产品名称 | 产品来源 | 产品优点 | 应用场景 |
| 液体 开瓶即用 省时省力 | 40123ES | 胰酶溶液(无酚红,含EDTA) | 猪胰脏 | 经典配方价格友好适用性广 | 大部分连续的强贴壁细胞系 |
| 40124ES | 胰酶溶液(无酚红,无EDTA) | ||||
| 40126ES | 胰酶溶液(含酚红,无EDTA) | ||||
| 40127ES | 胰酶溶液(含酚红,含EDTA) | ||||
| 40134ES | PerfCell Tryzyme™ Express酶,含酚红 | 无动物来源 | 温和解离,保持细胞活性室温稳定,使用更方便 | 需要确保细胞表面蛋白完整性的原代细胞等要求 | |
| 40135ES | PerfCell Tryzyme™ Express酶,无酚红 | ||||
| 40514ES | 重组胰蛋白酶消化液,无酚红 | ||||
| 40506ES | ACCUTASE细胞消化液 | 胰酶替代物,温和解离,无需清洗和中和 | 绝大多数原代细胞、哺乳动物细胞系以及昆虫细胞,尤其适合干细胞、原代细胞及细胞表面标记、病毒生长分析、流式细胞分析以及生物反应器相关检测实验要求场景 | ||
| 粉末 配制灵活 稳定性高 | 40101ES | 胰蛋白酶 | 猪胰脏 | 价格友好,适用性广 | 常规细胞培养传代和初生组织解离 |
| 20416ES | 重组胰蛋白酶(质谱级) | 毕赤酵母 | 高纯度β-trypsin>80%,α-trypsin<20%高活性>6800 USP units/mg无外源性病毒污染无糜蛋白酶等杂酶污染蛋白质组学酶解漏切率比进口产品低50% | 大部分连续的强贴壁细胞系20416ES具有不自切的特性,尤其适用于蛋白质分析,如蛋白质质谱、测序、肽图谱分析 | |
| 40512ES | 重组胰蛋白酶(药典级) | 大肠杆菌 | 高纯度β-trypsin≥70%,α-trypsin≤20%活性>3800 USP units/mg无外源性病毒污染无糜蛋白酶等杂酶污染 | ||
| 40507ES | Collagenase I 胶原酶I型 | 溶组织梭菌 | 含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶,酪蛋白酶,梭菌蛋白酶,胰蛋白酶活性) | 通常用于上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备 | |
| 40508ES | Collagenase II 胶原酶II型 | 含有更高的梭菌蛋白酶活性 | 通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备 | ||
| 40509ES | Collagenase III 胶原酶III型 | 含有更高的梭菌蛋白酶活性 | 常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备 | ||
| 40510ES | Collagenase IV胶原酶IV型 | 含有低胰酶活性 | 通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验,干细胞消化优先选择,比分散酶更温和,对细胞损伤更小,适用于有饲养层培养和无饲养层培养进行的团块传代 | ||
| 40511ES | Collagenase V胶原酶V型 | 含有更高的胶原酶活性和酪蛋白酶活性,更低的胰酶水平以降低对细胞膜蛋白的损伤 | 适用于胰腺小岛细胞和结缔组织细胞的分离 | ||
| 40104ES | Dispase II 分散酶II | 细菌 | 快速有效且温和,对细胞损伤小,且能维持细胞膜完整性,无支原体或其他动物病毒污染 | 可用于多种类型组织、原代细胞和类器官的分离等 | |
| 40516ES | Elastase, Lyophilized 弹性蛋白酶 | 猪胰腺 | 能够水解天然弹性蛋白,不被胰蛋白酶、糜蛋白酶或胃蛋白酶攻击 | 常用于解离含有大量细胞间纤维网络的组织,尤其适合II型肺细胞分离 | |
| 60373ES | Papain from papaya Latex 木瓜蛋白酶 | 番木瓜乳液 | 高比活性(≥15 units/mg protein),快速分解蛋白质肽键特异性,水解多种蛋白质和肽类反应条件温和,中性或弱酸性环境即可发挥作用室温稳定,使用更方便 | 常用于原代或神经元细胞解离,例如产后小鼠皮质神经元、平滑肌细胞(对兴奋刺激的敏感性不受影响)等、修饰红细胞表面、从IgG和IgM中制备抗体Fab片段、完整膜蛋白酶的溶解、从纯化的蛋白多糖内生产糖蛋白 |
注:无酚红款胰酶溶液更适合:流式细胞术(避免酚红干扰荧光信号);激素相关研究(如乳腺癌细胞、子宫内膜细胞等对雌激素敏感的实验);无血清培养或特殊培养系统(酚红可能干扰钠-钾平衡或培养基成分)。
产品信息
| 货号 | 40516ES08 / 40516ES10 / 40516ES60 / 40516ES80 |
| 规格 | 5 mg / 10 mg / 100 mg / 1 g |
| 分子量 | ≈25.9 KDa |
| 外观 | 冻干粉末 |
| 酶活力 | ≥3 U/mg protein |
| 酶活力单位定义 | 在25°C、pH 8.0条件下,每分钟水解1 μmol N-琥珀酰-L-丙氨酰-L-丙氨酰-L-丙氨酸-对硝基苯胺的酶量为一个单位 |
| 最适pH | 8.0~8.5 |
| 等电点 | 9.5 |
| 抑制剂 | DFP,烷基异氰酸酯,PMSF,α1-抗胰蛋白酶,α2-巨球蛋白,丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的二肽衍生物,硫酸盐修饰脂质等 |
| 来源 | 猪胰腺 |
产品应用
1. 组织解离:由于弹性蛋白在结缔组织的弹性纤维中浓度最高,弹性蛋白常用于解离含有广泛细胞间纤维网络的组织。为此,它通常与其他酶如胶原酶、胰蛋白酶和乳糜蛋白酶一起使用。尤其适用于II型肺细胞分离。
2. 膜蛋白溶解
3. 蛋白质序列研究
使用方法(仅供参考,具体请结合相关文献和实际实验条件进行调整)
1. 弹性蛋白酶储存液的配置
1.1 弹性蛋白酶Elastase可以用常见的平衡液溶液溶解,如0.05 M Tris-HCl缓冲液(pH 8.0~8.5),该pH范围是酶的最适环境,能够保持酶活性并避免在pH≤3.5时失活。具体配置的浓度根据具体应用调整。
【注】产品在浓度高于0.25%且中性pH环境中时,溶解度较差,易产生不溶物。如需配置高浓度缓冲体系,建议可以先用碱性缓冲液配置,再稀释至中性pH缓冲体系中(具体见注意事项1)。
1.2 配置好后用0.22 µm滤膜过滤除菌,可按需分装成小量,避免反复冻融。过滤后的储存液2~8℃保存约1-2周,如需长期保存,建议分装后,-25~-15℃或-85~-65℃保存,冻存前将缓冲液pH调至8.5左右稳定酶活性。
2. 动物模型(如COPD小鼠模型):
工作剂量:在COPD小鼠模型中,弹性蛋白酶Elastase的使用剂量可考虑为6 Units/只小鼠,每次雾化15~20 min,每周1次,持续4个月,再用0.3%戊巴比妥钠(50 mg/kg,腹腔注射)麻醉,通过气管插管连接肺功能测试仪器进行肺功能检测。
注意事项
1. 弹性蛋白酶在pH值低于3~4时不稳定。弹性蛋白酶冻干粉在中性pH(如pH 7~8)且浓度高于0.25% (w/v)时溶解度较低,易形成絮状物或不溶物。若发现溶液混浊,可能是溶解度不足导致的,需要重新配制或使用更高pH的缓冲液溶解。
2. 如果需要配置到高浓度的缓冲液,建议最好先用KCl或碱性缓冲液(如pH 9~10)配置原液,充分溶解后,再用中性缓冲液稀释到工作浓度,或者加到反应混合物或培养基中,以补偿离子强度或pH值的变化。pH值在4.0~10.4之间会较为稳定。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4. 本产品仅用于科研用途。
粉末2~8℃避光保存,有效期1年。储存液-25~-15℃避光冻存。





